GAF-3X

Bei GAF-3X (Gliadin-analoges Fusionspeptid) handelt es sich um ein teilweise deamidiertes Derivat des Gliadins. An Zöliakie (Glutenunverträglichkeit) erkrankte Patienten weisen Antikörper gegen dieses Antigen auf, während bei Gesunden keine Antikörper gegen GAF-3X vorkommen.

Daher ist es zur serologischen Diagnose der Zöliakie besser geeignet als Antikörper gegen das native, d.h nicht deamidierte Gliadin, die auch bei einem großen Anteil von Personen, die nicht an Zöliakie leiden, vorkommen und deswegen hinsichtlich der Erkrankung als unspezifisch zu betrachten sind.

Die serologische Diagnose der Antikörper gegen das GAF-3X wird als Anti-Gliadin-GAF-3X-ELISA durchgeführt. Zur Herstellung von GAF-3X wird synthetische DNS durch Expressionsvektoren kloniert, in Escherichia coli exprimiert und anschließend durch biochemische Reinigung dargestellt.

Diagnostik

Ein Kennzeichen der Zöliakie ist die Bildung von Antikörpern der Immunglobulinklassen IgA und IgG gegen natives Gliadin sowie gegen Gewebstransglutaminase (tissue Transglutaminase, tTG). Daher werden zur Diagnostik der Zöliakie das Blut der Patienten nach diesen Antikörpern untersucht. Hierbei zählen die Antikörper gegen tTG im Gegensatz zu den anti-Gliadin-Antikörpern als zuverlässige Marker.

Antikörper gegen tTG weisen eine über 95%-ige Sensitivität und Spezifität auf und besitzen damit eine hohe diagnostische Aussagekraft. Die serologische Diagnostik wird aber dadurch erschwert, dass bei Zöliakiepatienten die Prävalenz eines selektiven Mangels an Antikörpern des Typs IgA etwa zehnfach höher ist als in der normalen Bevölkerung. Daher fällt bei ca. vier Prozent der Patienten der Nachweis von IgA-Antikörpern gegen tTG negativ aus. Gleiches gilt für IgA-Antikörper gegen natives Gliadin, deren Prävalenz zugleich deutlich niedriger ist.

Bei anderen gastrointestinalen Erkrankungen und bei Gesunden kann in mehr als 20 % der Proben der Nachweis von IgG-Antikörpern gegen Gliadin positiv ausfallen, so dass der Nachweis von IgG-Antikörpern gegen Gliadin für die Diagnostik nur eingeschränkt verwertbar ist und nicht mehr durchgeführt werden sollte.

Im Jahr 2004 konnte eine Forschergruppe der Universität Leipzig unter Leitung von Prof. Dr. Thomas Mothes nachweisen, dass bestimmte deamidierte Bereiche des Gliadins existieren, gegen die nur bei Zöliakiepatienten aber nicht bei anderen Menschen Antikörper vorliegen. Die Deamidierung, die in vivo durch tTG durchgeführt wird, resultiert in der Umwandlung der Aminosäure Glutamin in Glutamat. Durch chemische Synthese konnte weiterhin gezeigt werden, dass sich die diagnostische Kompetenz, v. a. hinsichtlich des Nachweises von Antikörpern der Klasse IgG, durch die Verwendung abgewandelter Peptide noch steigern lässt. Die beiden besten Peptide wurden schließlich in jeweils dreifacher Kopie zu GAF-3X zusammengesetzt.^[1]

Zur optimalen Diagnostik sollten bei Verdacht auf Zöliakie parallel Antikörper gegen Gewebstransglutaminase (IgA) und gegen GAF-3X untersucht werden. Dies garantiert die höchste serologische Trefferquote.

Vergleich von Antikörpern nativen Gliadin versus GAF-3X nach C. Prause et. al (N=181)

Test	Sensitivität	Spezifität
Anti-n-Gliadin (IgA)	78,5 %	80 %
Anti-n-Gliadin (IgG)	81,2 %	79,1 %
Anti-GAF-3X (IgA)	87,9 %	89,1 %
Anti-GAF-3X (IgG)	95,0 %	94,6 %

Die hohe Aussagekraft der Antikörper gegen tTG und GAF-3X ist dazu geeignet in Zukunft die Anzahl der Biopsien, die zurzeit als endgültiger Nachweis der Zöliakie erforderlich sind, deutlich zu reduzieren. Insbesondere im Bereich der pädiatrischen Diagnostik kann somit die Belastung der Patienten deutlich reduziert werden.

Einzelnachweise

1. ↑ Schwertz et al. Serologic assay based on gliadin-related nonapeptides as a highly sensitive and specific diagnostic aid in celiac disease. Clin Chem. 2004 Dec;50(12):2370-5. PMID 15472035

Literatur

• Lentze Pädiatrie Grundlagen und Praxis Seite 884ff Springer 2003 ISBN 3540436286
• Mothes T. Deamidated gliadin peptides as targets for celiac disease-specific antibodies. Adv Clin Chem. 2007;44:35-63. Review. PMID 17682339
• Agardh D Antibodies against synthetic deamidated gliadin peptides and tissue transglutaminase for the identification of childhood celiac disease. Clin Gastroenterol Hepatol. 2007 Nov;5(11):1276-81. PMID 17683995

Weblinks

• C. Prause et al. Der neue Anti-GAF(3X)-ELISA: Zuverlässige serologische Diagnose der Zöliakie (pdf)

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