Phasenkontrastmikroskop

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Phasenkontrastmikroskop

Aufnahmen

Ein Phasenkontrastmikroskop ist ein Mikroskop, bei welchem die untersuchten Proben nicht eingefärbt sein müssen, um sie zu betrachten. Das Phasenkontrastmikroskop kann schwach oder gar nicht gefärbte Zellen mittels ihrer unterschiedlichen Brechzahlen in Bezug auf das umgebende Medium besser darstellen. Somit können lebende Zellen mikroskopiert werden, da durch Färbemittel die zu untersuchenden Zellen oft zugrunde gehen.

In einem Phasenkontrastmikroskop wird eine Ringblende im Kondensor und ein Phasenring im Objektiv eingebaut. Die Ringblende wird durch den Kondensor und das Objektiv auf den Phasenring abgebildet. Dieser besteht aus einem Material, welches das durchfallende Licht dämpft und ihm gleichzeitig eine ganz bestimmte Phasenverschiebung hinzufügt. Befindet sich kein Präparat unter dem Mikroskop, so durchläuft das gesamte von der Lichtquelle zum visuell sichtbaren Bild verlaufende Licht den Phasenring (=sog. direktes oder ungebeugtes Licht). Wird jedoch als Beispiel ein Präparat mit transparenten Zellen in den Strahlengang gebracht, so wird an den Strukturen der Zellen das Licht durch Beugung teilweise abgelenkt. Dieses "gebeugte Licht" verläuft - soweit es vom Objektiv aufgenommen wird - ebenfalls zum visuell sichtbaren Zwischenbild. Im Gegensatz zum ungebeugten Licht verläuft das gebeugte Licht jedoch ganz überwiegend nicht durch den Phasenring und wird entsprechend nicht durch diesen beeinflusst.

Im konventionellen Hellfeld-Mikroskop interferieren gebeugtes und direktes Licht im Zwischenbild so, dass dort die durch das Präparat erzeugte Phasenverschiebung reproduziert wird. Diese Phasenverschiebung ist nicht sichtbar. Der Phasenring im Phasenkontrastmikroskop modifiziert nun das direkte Licht derart, dass es mit dem gebeugten Licht im Zwischenbild destruktiv interferieren kann. Hierdurch entsteht ein Hell-Dunkel-Kontrast wie bei einem gefärbten Präparat. Die durch das Präparat ursprünglich erzeugte nicht wahrnehmbare Phasenverschiebung wird also in einen sichtbaren Kontrast umgewandelt.

Siehe auch: Phasenkontrast, Differential Interference Contrast