- PUC18
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pUC19 und pUC18 sind künstlich hergestellte, bakterielle Plasmide, die zu den am häufigsten verwendeten Vektoren zur Klonierung und Expression von Proteinen im Bakterium Escherichia coli gehören. Damit haben sie in der biologischen Forschung und Gentechnik eine große Bedeutung. Ihr spezieller Vorteil ist eine besonders hohe Anzahl von Kopien pro Bakterienzelle (sogenannte high copy number-Plasmide), so dass sehr einfach eine große Menge an Plasmid isoliert werden kann.
Sie sind mit 2686 bp relativ klein und ihnen können an speziellen Schnittstellen zusätzliche DNA-Fragmente eingefügt werden. Die Translation von eingefügten Genen in E. coli kann durch Induktion des eingebauten lac-Operons (N-terminales Fragment) mit IPTG gezielt eingeleitet werden. Zur Selektion von pUC-positiven Bakterien nach Einfügung des Plasmids in einen geeigneten Bakterienstamm (Transformation) dient ein in den pUC-Plasmiden vorhandenes Ampicillin-Resistenzgen (ampR). Die beiden pUC-Plasmide unterscheiden sich lediglich in der inversen Orientierung der Multiple Cloning Sites (MCS), die aus einer Aufeinanderfolge verschiedener Restriktions-Schnittstellen bestehen.
Der Name der Plasmide leitet sich von der University of California (UC) ab, an der diese Plasmide (p) konstruiert wurden.[1]
Quellen
- ↑ C. Yanisch-Perron et al. (1985): Improved M13 phage cloning vectors and host strains: nucleotide sequences of the M13mp18 and pUC19 vectors. In: Gene. Bd. 33, S. 103-119. PMID 2985470
Siehe auch
- pBR322 (Ausgangsvektor)
Weblinks
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