Vital-Fluoreszenz-Doppelfärbung

Die Vital-Fluoreszenz-Doppelfärbung dient der Unterscheidung zwischen lebenden und toten Zellen.

Zu einer Zellkultur werden zwei Substanzen hinzu gegeben, die zu Fluoreszenz angeregt werden können. Die eine Substanz (SYT09) ist ein Farbstoff der in der Zelle verstoffwechselt wird und anschließend lebende Zellen grün fluoreszieren lässt. Die zweite Substanz, Propidiumiodid ist in der Lage sich in die DNA und RNA einzulagern und dabei rote Fluoreszenz zu verursachen. Sie wird jedoch von lebenden Zellen nicht aufgenommen. Die Membran toter Zellen ist jedoch löchrig, so dass der Farbstoff eintreten kann und die Nukleinsäuren in der Zelle rot färbt.

Das Verfahren ist nicht auf Eubakterien beschränkt; es lassen sich auch Archaeen und Eukaryotische Zellen damit anfärben. Im Handel ist dieses System unter dem Namen LIVE/DEAD BacLight von Invitrogen erhältlich.

Quellen

• Boulos L, Prévost M, Barbeau B, Coallier J, Desjardins R.:J Microbiol Methods. 1999 Jul;37(1):77-86 PMID 10395466
• Michael Berney, Frederik Hammes, et al.: Appl Environ Microbiol. 2007 May; 73(10): 3283–3290. PMID PMC1907116

Weblinks

• Protokoll: http://www.thelabrat.com/protocols/bacterialviability.shtml