Fluoreszenzspektroskopie

Fluoreszenzspektrum von Chinin mit deutlich sichtbarem Stokes-Shift

Die Fluoreszenzspektroskopie nutzt Fluoreszenz-Phänomene zur Identifizierung und Quantifizierung von Substanzen. Fluoreszenz ist die verzögerungsfreie Emission nach 1-100 ns ohne Nachleuchten. Nach folgender Gleichung ist die Fluoreszenz direkt proportional zur Anregungsstrahlung.^[1]

$F = 2{,}3 \cdot Q_\mathrm{F} \cdot I_0 \cdot \varepsilon \cdot c \cdot d$

mit

F: Fluoreszenz

Q_F: Quantenausbeute

I₀: Anregungsstrahlung

ε: molarer Extinktionskoeffizient

c: Konzentration

d: Schichtdicke der Küvette

Die Anregung braucht mehr Energie, daher sind die Fluoreszenzspektren zu längeren Wellenlängen verschoben (Stokes-Shift). Moleküle, die ebenfalls weit auseinander liegende Schwingungsniveaus besitzen, können zur Fluoreszenzlöschung (Quenching) führen.^[2] Um diese Effekte zu berücksichtigen kann mit einer Standardaddition gearbeitet werden.

Geräteaufbau

Fluorimeter mit Autosampler und Auswertecomputer zur Bestimmung von Quecksilber

Der Aufbau eines Fluorimeters ist ähnlich dem eines Photometers, wobei jedoch die Fluoreszenz mit bestimmter Emissionswellenlänge (λ_em) stets im Winkel von 90° gemessen wird um die Anregungsstrahlung (λ_ex) nicht mit zu erfassen.^[3]

Siehe auch

• Einzelmolekülfluoreszenzspektroskopie
• Fluoreszenzmikroskopie

Einzelnachweise

1. ↑ Schwedt: Analytische Chemie. 2 Auflage. WILEY-VCH, 2008, ISBN 978-3-527-31206-1. 
2. ↑ P. Atkins, Kurzlehrbuch physikalische Chemie, 3. Aufl., Wiley-VCH, 2002.
3. ↑ Gey: Instrumentelle und Analytik und Bioanalytik. 2 Auflage. Springer, 2008, ISBN 978-3-540-73803-9, doi:10.1007/978-3-540-73804-6. 

Weblinks

 Commons: Atomic fluorescence spectroscopy – Sammlung von Bildern, Videos und Audiodateien