Klenow-Fragment

Klenow-Fragment

Als Klenow-Fragment, auch Klenow-Enzym, wird das größere der beiden Proteinfragmente der DNA-Polymerase I aus Escherichia coli bezeichnet, die nach enzymatischer Spaltung mit Subtilisin entstehen. Es besitzt noch die 5'→3' Polymerase-Aktivität und die 3'→5' Exonuklease-Aktivität (proof reading), jedoch nicht mehr die 5'→3' Exonuklease-Aktivität der DNA-Polymerase I. Das Proteinfragment wurde erstmals 1970 von dem dänischen Biochemiker Hans Klenow beschrieben.[1]

Verwendung

Das Klenow-Fragment wird in der Molekularbiologie für verschiedene Zwecke verwendet:

  • Synthese von doppelsträngiger DNA (Polymerasefunktion)

Das Klenow-Fragment war das ursprüngliche Enzym[2], welches für die Amplifizierung von DNA mittels PCR verwendet wurde, bevor es durch thermostabile Polymerasen, wie die Taq-Polymerase[3], ersetzt wurde.

  • Auffüllen von 5'-überstehenden, einzelsträngigen DNA-Sequenzen nach Restriktionen (Polymerasefunktion)
  • Abbau von 3'-überstehenden, einzelsträngigen DNA-Sequenzen nach Restriktionen (Exonukleasefunktion)

Diese Aktivitäten dienen nach dem Schneiden von DNA mit Restriktionsenzymen zur Herstellung von sogenannten blunt ends, die mittels T4-Ligase verbunden werden können (z.B. bei Klonierungen).

Einzelnachweise

  1. Klenow, H. & Henningsen, I. (1970): Selective elimination of the exonuclease activity of the deoxyribonucleic acid polymerase from Escherichia coli B by limited proteolysis. In: Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 65(1):168-175. PMID 4905667 PDF
  2. Saiki, R.K. et al. (1985): Enzymatic amplification of beta-globin genomic sequences and restriction site analysis for diagnosis of sickle cell anemia. In: Science. 230(4732):1350-1354. PMID 2999980
  3. Saiki, R.K. et al. (1988): Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase. In: Science. 239(4839):487-491. PMID 2448875

Wikimedia Foundation.

Игры ⚽ Поможем написать реферат

Schlagen Sie auch in anderen Wörterbüchern nach:

  • Klenow fragment — Klenow fragment. См. фрагмент Кленова. (Источник: «Англо русский толковый словарь генетических терминов». Арефьев В.А., Лисовенко Л.А., Москва: Изд во ВНИРО, 1995 г.) …   Молекулярная биология и генетика. Толковый словарь.

  • Klenow fragment — The Klenow fragment is a large protein fragment produced when DNA polymerase I from E. coli is enzymatically cleaved by the protease subtilisin. First reported in 1970 [cite journal| author=Klenow H and Henningsen I | title=Selective Elimination… …   Wikipedia

  • Klenow fragment — Larger part of the bacterial DNA polymerase I (76 kD) that remains after treatment with subtilisin; retains some but not all exonuclease and polymerase activity …   Dictionary of molecular biology

  • Klenow fragment — A truncated form of DNA polymerase I from E. coli, used extensively for the production of synthetic DNA molecules as it retains polymerase and 3 exonuclease activities, but not 5 exonuclease activity …   Glossary of Biotechnology

  • Klenow-Enzym — Als Klenow Fragment bzw. Klenow Enzym wird die größere der beiden Untereinheiten der DNA Polymerase I von Escherichia coli bezeichnet. Es wurde nach seinem Entdecker, dem dänischen Biochemiker Hans Klenow benannt. Eigenschaften Es verfügt über… …   Deutsch Wikipedia

  • Klenow-Polymerase — Als Klenow Fragment bzw. Klenow Enzym wird die größere der beiden Untereinheiten der DNA Polymerase I von Escherichia coli bezeichnet. Es wurde nach seinem Entdecker, dem dänischen Biochemiker Hans Klenow benannt. Eigenschaften Es verfügt über… …   Deutsch Wikipedia

  • Fragment de Klenow — Le fragment de Klenow est le plus gros des 2 fragments protéiques formés par l hydrolyse de l ADN polymérase I d Escherichia coli par une protéase (subtilisine). Découvert en 1970, il conserve deux des activités catalytiques de l ADN polymérase… …   Wikipédia en Français

  • fragment — A small part broken from a larger entity. acentric f. SYN: acentric chromosome. Brimacombe f. a ribonucleoprotein f. obtained by mild ribonuclease treatment of ribosomes. butterfly f. a broad triangular f. that is commonly present in …   Medical dictionary

  • Kf — Klenow fragment …   Medical dictionary

  • Kf — • Klenow fragment …   Dictionary of medical acronyms & abbreviations

Share the article and excerpts

Direct link
Do a right-click on the link above
and select “Copy Link”