Mitochondrialer Tumorsuppressor 1

Mitochondrialer Tumorsuppressor 1
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Masse/Länge Primärstruktur	1270 Aminosäuren
Sekundär- bis Quartärstruktur	Homodimer
Kofaktor	AGTR2, PTPN6
Isoformen	ATIP1, ATIP2, ATIP3a, ATIP3b, ATIP4, weitere
Bezeichner
Gen-Name	MTUS1
Externe IDs	OMIM: 609589 UniProt: Q9ULD2   MGI: 2142572
Vorkommen
Übergeordnetes Taxon	Wirbeltiere[1]

Der Mitochondriale Tumorsuppressor 1 (MTUS1) ist ein Protein in Wirbeltieren, das bei der Regulation des Zellzyklus ein Rolle spielt. Das menschliche Gen wurde erstmals im Jahr 2003 beschrieben.

Das Protein interagiert mit dem Angiotensin II AT2-Rezeptor, was die Antiproliferation der jeweiligen Zellen und die Hemmung der ERK2-Aktivität des klassischen MAP-Kinase-Wegs unterstützt. Des Weiteren ist es möglicherweise am intrazellulären Transport des AT2-Rezeptors beteiligt, um als Tumorsuppressorgen zu wirken.

Proteinfunktion

Beinahe zeitgleich isolierten, amplifizierten und sequenzierten drei Arbeitsgruppen das MTUS1-Gen, das je nach untersuchter Funktion die unterschiedlichen Namen MTSG, ATIP oder ATBP erhalten hat.^[2][3][4]

2003 wurde erstmals mittels der Differential-Display-Methode ein Gen isoliert, das bei nicht-proliferierenden und ausdifferenzierten Nabelschnurzellen (HUVEC) im Unterschied zu proliferierenden, undifferenzierten Zellen deutlich hochreguliert war. Diesem Gen wurde der Name mitochondrial tumor suppressor gene (MTSG1) gegeben.^[2]

Des Weiteren bewirkte die rekombinante Expression von MTSG1 eine Hemmung der Zellproliferation in einer pankreatischen Tumorzelllinie. Aufgrund des ermittelten anti-proliferierenden Effekts und unter der Berücksichtigung der Lokalisation des Gens auf Chromosom 8 Genlocus p21.3-22, das bei einer Vielzahl unterschiedlicher Tumorzellen eine Deletion aufweist, fühlten sich die Autoren darin bestätigt, dass MTSG1 ein Tumorsuppressorgen darstellt.

In zwei anderen Arbeitsgruppen wurde an der Fähigkeit des Moleküls an das carboxy-terminale Ende des Angiotensin II AT2-Rezeptors zu binden gearbeitet, was wiederum dessen Expression und des Weiteren die Signalwege des Rezeptors beeinflussen sollte.^[3][4] Unter Verwendung der cDNA-Bibliothek einer ausgewachsenen menschlichen Lunge wurde eine 1.977 Nukleotide umfassende cDNA, die ein 436 Aminosäuren langes Polypeptid kodierte und zudem eine 100%ige Homologie zum MTSG1 aufwies, identifiziert. Aufgrund der neu entdeckten Funktionseigenschaft wurde das Protein human AT2-interacting protein 1 (hATIP1) genannt.^[3] Anschließend wurde unter Verwendung der cDNA-Bibliothek einer fetalen Maus das zugehörige Mausmolekül mit dem abgekürzten Namen „mATIP1“, das eine 86%ige Homologie zum „hATIP1“ aufwies isoliert.^[3] mATIP1 vermindert die Phosphorylierung der extracellular signal-related kinase 2 (ERK2), des klassischen MAP-Kinase-Weges, falls diese durch Insulin und die Wachstumsfaktoren bFGF (basic fibroblast growth factor) und EGF (epidermal growth factor) stimuliert worden war. Des Weiteren hemmt das vorübergehend transfizierte mATIP1 die Proliferation von CHO-AT2-Klonen und Gefäßmuskelzellen der Ratte, falls diese vorher mit fetalem Kälberserum, EGF, PDGF(platelet-derived growth factor) und bFGF induziert wurde. Diese Effekte benötigten die Anwesenheit des Angiotensin II AT2-Rezeptors und wurden nur ansatzweise durch die Stimulation mit Angiotensin II verstärkt .

Unter Verwendung der cDNA-Bibliothek eines 11-Tage alten Mausembryos wurde ein 50 Kilodalton schweres, AT2-Rezeptor-bindendes Protein isoliert und als ATBP50 benannt.^[4] ATBP50 ist identisch zum mATIP1. Allerdings berichteten hier die Autoren, dass ATBP50 dazu benötigt wird den AT2-Rezeptor auf optimale Weise auf der Zelloberfläche zu exprimieren. Wie zudem in ATBP50-Knockdown-Experimenten gezeigt wurde (Transfektion mit kurzer, zur ATBP50-mRNA komplementärer RNA), wird ATBP50 auch für die Inhibition der ERK2-Aktivität und die, durch den AT2-Rezeptor vermittelte, Antiproliferation benötigt.

Bisherige Forschungen konzentrierten sich ausschließlich auf das ATIP1 beziehungsweise ATBP50, obwohl das MTUS1-Gen für eine ganze Familie an Proteinen in der Maus und im Menschen kodiert. Die Isoformen ATIP1, 3 und 4 des Menschen und die der Maus ATBP50, 135 und 60 werden durch die alternative Nutzung des Promotors und/oder dem alternativen Spleißen erhalten.

Regulation der Aktivität

Der hemmende Effekt von ATIP1 bzw. ATBP50 auf die ERK1/2-Aktivität und die Zellproliferation scheint die Anwesenheit, jedoch nicht die Stimulation des AT2-Rezeptors zu benötigen.^[3][4] Dennoch verstärkt die Stimulation mit Angiotensin II den Effekt.

Interaktionen mit Liganden und anderen Proteinen

ATIP und ATBP wurden mit der Yeast two-hybrid-Methode isoliert, wobei als Köder (bait) das C-terminale Ende des AT2-Rezeptors diente.^[3][4] Zwei Arbeitsgruppen bestätigten zusätzlich durch Ko-immunopräzipitation, dass ATIP1 bzw. ATBP50 mit dem AT2-Rezeptor interagieren. Allerdings enthält die AT2-Rezeptor-bindende Domäne des ATBP50 nicht die letzten 30 Aminosäuren des C-terminalen Endes, die von Nouet et al. (2004) beim ATIP1, als eine 30 Aminosäuren umfassende Poly-Prolin-Sequenz beschrieben wurde. Nach Nouet et al. (2004) gehören 118 Aminosäuren vom äußersten C-terminalen Ende bis zu den mittleren Regionen des ATIP1 zu der interagierenden Domäne.

Die anderen Isoformen ATBP60 und ATBP135 scheinen nach nicht an den AT2-Rezeptor zu binden.^[4]

Neben der Bindung an den AT2-Rezeptor wurden jeweils für die Isoformen des ATIP bzw. ATBP die Möglichkeiten zur Homo- und Heterodimerisation beschrieben.^[3][4]

Regulation der Konzentration

Die Expression des MTUS1 bzw. des ATBP scheint von der Koexpression mit dem AT2-Rezeptor abhängig zu sein, da in AT2-Rezeptor-defizienten Mäusen die ATBP-mRNA-Expression auf bis zu 10% der normalen Expression reduziert war (Wruck et al 2005). Des Weiteren ließ sich durch die Stimulation des AT2-Rezeptors mit Angiotensin II die Expression des ATBP steigern.

Ursprünglich als Tumor-Nekrose-Faktor Suppressorgen beschrieben, zeigte das MTUS1 in Tumorzellen, im Vergleich mit Kontrollgewebe, eine stark gesenkte Expression.^[2] Bis heute wurden diese Beobachtungen an einem Pankreaskarzinom^[2] und an einem Eierstockkarzinom^[5] bestätigt.

Subzelluläre Lokalisation

Die subzelluläre Lokalisation des Moleküls ist in weiten Teilen noch unklar. Sie könnte zelltypspezifisch sein oder sie könnte sich in Abhängigkeit des jeweiligen Interaktionspartners ändern. MTSG1 wurde als hauptsächlich am Mitochondrium lokalisiert beschrieben.^[2] Des Weiteren wurde die Existenz einer N-terminalen mitochondrialen Zielsequenz postuliert. ATBP soll wiederum durch eine C-terminale Domäne mit dem Golgi-Apparat interagieren. Diese Beobachtung wird gestützt durch Homologien des ATBP mit Golgi-bindenden „Hook“-Proteinen.^[4]

Spleißvarianten

Einige Isoformen für ATIP bzw. ATBP sind beschrieben.^[3][4] ATIP wurde aus Gewebe des Menschen (hATIP1) und der Maus isoliert. Northern-Blot-Analysen mit einer 3'-ATIP-Sonde ließen drei große mRNA-Transkripte erkennen, die auf den Höhen von 6,9; 4,2 und 1,8 Kilobasen wanderten. Auf der Proteinebene wurden durch Western-Blot-Analysen mittels Antikörpern, die gegen die AT2-Rezeptor-bindende Domäne des ATIP gerichtet waren, vier große Polypeptide detektiert. Diese Polypeptide hatten Molekülmassen von 30, 60, 120 und 180 Kilodalton. Diese könnten verschiedene Isoformen des hATIP darstellen oder das Vorhandensein von post-translationalen Modifikationen oder der Anwesenheit von ATIP-Dimeren widerspiegeln.

Einzelnachweise

1. ↑ Homologe bei OMA
2. ↑ ^{a b c d e} S. Seibold u. a.: Identification of a new tumor suppressor gene located at chromosome 8p21.3-22. In: FASEB J 17, 2003, S. 1180–1182. PMID 12692079
3. ↑ ^{a b c d e f g h} S. Nouet u. a.: Trans-inactivation of receptor tyrosine kinases by novel angiotensin II AT2 receptor-interacting protein, ATIP. In: J Biol Chem 279, 2004, S. 28989–28997. PMID 15123706
4. ↑ ^{a b c d e f g h i} C. J. Wruck u. a.: Regulation of transport of the angiotensin AT2 receptor by a novel membrane-associated Golgi-Protein. In: Arterioscler Thromb Vasc Biol 15, 2005, S. 539–617. PMID 15539617
5. ↑ P. Horak u. a.: Perturbation of the tumor necrosis factor--related apoptosis-inducing ligand cascade in ovarian cancer: overexpression of FLIPL and deregulation of the functional receptors DR4 and DR5. In: Clin Cancer Res 11, 2005, S. 8585–8591. PMID 16361541

Literatur

• M. Di Benedetto u. a.: Mutation analysis of the 8p22 candidate tumor suppressor gene ATIP/MTUS1 in hepatocellular carcinoma. In: Mol Cell Endocrinol 252, 2006, S. 207–215. PMID 16650523
• B. Frank u. a.: Copy number variant in the candidate tumor suppressor gene MTUS1 and familial breast cancer risk. In: Carcinogenesis, 28, 2007, S. 1442–1445. PMID 17301065
• M. Di Benedetto u. a.: Structural organization and expression of human MTUS1, a candidate 8p22 tumor suppressor gene encoding a family of angiotensin II AT2 receptor-interacting proteins, ATIP. In: Gene 380, 2006, S. 127–136. PMID 16887298
• J. F. Rual u. a.: Towards a proteome-scale map of the human protein-protein interaction network. In: Nature 437, 2005, S. 1173–1178. PMID 16189514
• T. Ota u. a.: Complete sequencing and characterization of 21,243 full-length human cDNAs. In: Nature Genetics 36, 2004, S. 40–45. PMID 14702039
• R. L. Strausberg u. a.: Generation and initial analysis of more than 15,000 full-length human and mouse cDNA sequences. In: PNAS 99, 2003, S. 16899–16903. PMID 12477932
• T. Nagase u. a.: Prediction of the coding sequences of unidentified human genes. XV. The complete sequences of 100 new cDNA clones from brain which code for large proteins in vitro. In: DNA Res 6, 2000, S. 337–345. PMID 10574462